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Electrophorèse des sérums (immunisés et non immunisés) sur gel d'agarose
Manipulations et résultats en 1 h 30
"Immunisation et synthèse d’anticorps"
Objectifs cognitifs :
Lors des processus d’immunisation, des anticorps sont synthétisés.
Comparaison par électrophorèse des protéines présentes dans un sérum immunisé et non-immunisé.
Manipulation proposée :
Migration par électrophorèse sur gel d'agarose, de deux sérums (immunisé et non immunisé). Mise en évidence des Gamma-globulines.
Composition pour 48 dépôts (48 élèves) :
• 200 µL de sérum de lapin immunisé contre la BSA (lyophilisé)
• 200 µL de sérum de lapin non-immunisé
• Bleu de charge
• Agarose 4g
• 2 x 500 ml de tampon TBE 1x
Notice technique et pédagogique disponible sur notre site.
Matériel nécessaire :
• Cuve à électrophorèse ADN BLUEGEL ou autre
• Alimentation 160-180 V pour les cuves standards
Conservation : 4 mois au réfrigérateur
Electrophorèse sur gel d'agarose:
Durée de la migration : 30 à 40 min avec la cuve BLUEGEL; 20-30 min avec des cuves standards à 160V
L'électrophorèse se fait au cours d'une séance d'1H30.
Matériel nécessaire :
Cuve à électrophorèse BLUEGEL ou autre cuve pour migration sur agarose avec alimentation
Micropipettes 2-20 µL